جداسازی و القای پرتوانی در سلول های کراتینوسایت انسان با استفاده از پلاسمید حاوی چهار فاکتور رونویسی klf4 ، sox2، oct4 و c-myc

بازبرنامه ریزی سلول های تمایز یافته انسان به سلول های القا شده پرتوان (ips) در زیست شناسی پایه، توسعه دارویی و پیوند دارای کاربرد می باشد. این کار اولین بار به واسطه بیان چهار فاکتور رونویسی oct4، sox2، c-myc و klf4 انجام شد. تاکنون به منظور بهینه سازی و نزدیک کردن این فن آوری به کاربردهای بالینی تلاش های بسیاری صورت گرفته است، اما همچنان نیاز به مطالعات پایه ای بیشتری بر روی آن وجود دارد. در این تحقیق، سلول های کراتینوسایت از نمونه پوست ختنه گاه انسان جداسازی و کشت شدند. انتقال ژن با استفاده از پلاسمید pcag-gfp بهینه سازی شد. برای ترانسفکشن سلول ها از روش الکتروپوریشن و لیپید کاتیونیک افکتن استفاده شد. پس از آن سلول های ips با استفاده از وکتور پلاسمیدی pcagmkosie تولید شده و از نظر بیان مارکرهای جنینی مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج ترانسفکشن سلول ها با چهار فاکتور رونویسی oct4، sox2، c-myc و klf4 نشان داد سلول های کراتینوسایت در یک فرایند تدریجی و در طول 3-2 هفته بازبرنامه ریزی می شوند، به طوری که در نهایت مارکرهای پرتوانی از جمله آنتی ژن ها و ژن های اختصاصی سلول های es در آن ها بیان می شوند. دودمان های ips تولید شده با استفاده از وکتور پلاسمیدی در این تحقیق، می توانند ابزار ارزشمندی برای مطالعه بر روی سلول های ips و مکانیسم بازبرنامه ریزی باشند. این مطالعات می تواند در نهایت ما را از چگونگی کنترل ژنوم و تمایز سلولی گسترش دهد و از سوی دیگر راهگشای کاربردهای بالینی ایمن سلول های ips باشد.